河北医药２０１２年４月第３４卷第７期Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１２，Ｖｏｌ ３４ Ａｐｒ Ｎｏ．７ ９６７ 为０．７４６，具有中度的诊断意义。所以血浆ＢＮＰ对于诊断老年 人ＮＥＦＨＦ具有一定的作用。 本研究的研究对象主要为高龄老年，目前国内外暂无该年 龄段ＢＮＰ水平的相关研究，本实验的结果可为上述特定人群 ｍａｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ａｃｔｉｖｅ ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐａｓｓｉｖｅ ｓｔｉｆｆｎｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ ｌｅｆｔ ｖｅｎｔｉｃｌｒｅ．ＮＥ— ＪＭ，２００４。３５０：１９５３一ｌ９５９． ４ Ｂａｎｅｏｅｅ Ｐ，Ｃｌａｒｋ ＡＬ，Ｃｌｅｌａｎｄ ＪＧＦ，ｅｔ ａ１．Ｎｏｍａｌ ｅｊｅｃｔ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌ— ｕｒｅ：ａ ｄｉｍｃｕｌｔ ｐｒｏｂｌｅｍ ｉｎ ｔｈｅ ｅｌｄｅｒｌｙ．Ａｍ Ｊ Ｇｅｒｉａｔｒ Ｃａｒｄｉｏｌ，２００４，１３：１６． ２１． 的ＮＥＦＨＦ诊断提供一定的参考作用。但本研究的样本数较 少，有待于做更多的大样本研究来进一步证实。 参考文献 １ 田玉龙，邢玉良，孙艳．脑钠肽及高敏Ｃ反应蛋白慢性心力衰竭严重 程度的关系．河北医药，２０１０，３２：３１４６－３１４７． ２ Ｒｅｍｍｅ ＷＪ，Ｓｗｅｄｂｅｒｇ Ｋ．Ｔａｓｋ Ｆｏｒｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｈｅａｒｔ Ｆａｉｌｕｒｅ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ．Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ５ Ｊｅｎｎｙ ＡＤ，Ｐａｕｌ ＰＧ，Ｅｖａ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ａ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ａｃｃｕｒａｃｙ ｏｆ Ｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｆｏｒ Ｈｅａｒｔ Ｆａｉｌｕｒｅ．Ａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ， ２００４．１６４：１９７８—１９８４． ６ Ａｎｇｅｊａ ＢＧ，Ｇｒｏｓｓｍａｎ Ｗ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｍａｌ ｅｊｅｃｔ ｆｒａｅ— ｔｉｏｎ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００３，１０７：６５９－６６３． ７孙海英．慢性心力衰竭患者血浆脑钠肽水平变化及临床意义．中国 基层医药，２０１１，１８：１５１４—１５１５． ８ Ｃｈｅｉｔｌｉｎ ＭＤ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ－ｃｈａｎｇｅｓ ｗｉｔｈ ａｇｉｎｇ．Ａｍ Ｊ Ｇｅｒｉａｔｒ Ｃａｒｄｉｏｌ，２００３，１２：９ １３． ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ．Ｅｕｒ Ｈｅａｒｔ Ｊ，２００１，２２： ｌ５２７．１５６０． （收稿日期：２０１１一ｌ２一Ｏ６） ３ Ｚｉｌｅ ＭＲ，Ｂａｉｃｕ ＣＦ，Ｇａａｓｃｈ ＷＨ．Ｎｏｍａｌ ｅｊｅｃｔ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ．ａｂｎｏｒ． ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－７３８６．２０１２．０７．００２ ・论著・ ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ质粒对ＵＵＯ小鼠肾脏间质纤维化的 影响 杨艳君张东风刘玲王丽 史永红 【摘要】 目的影响。方法达。结果利用单侧输尿管梗阻（ｕｕｏ）小鼠肾纤维化模型，采用尾静脉注射的方法整体转染 ＣＴＧＦ—ｓｉＲＮＡ质粒抑制肾脏结缔组织生长因子（ＣＴＧＦ）的表达，观察敲低ＣＴＧＦ表达对肾脏间质纤维化的 制备ＵＵＯ模型及活体ＣＴＧＦ基因转染；应用免疫组织化学染色法检测ｏｔ一平滑肌肌动蛋白 转染ＣＴＧＦ—ｓｉＲＮＡ质粒的ＵＵＯ小鼠ＣＴＧＦ及仅一ＳＭＡ的基因表达明显下降（Ｐ＜０．０５）。结论 （ｏｔ—ＳＭＡ）的表达；Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＣＴＧＦ及ｏｔ—ＳＭＡ蛋白的表达；半定量ＲＴ—ＰＣＲ检测 一ＳＭＡ ｍＲＮＡ的表 经小鼠尾静脉注射ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ质粒能显著抑制小鼠肾ＣＴＧＦ和０【一ＳＭＡ基因表达并能有效抑制小鼠肾 脏间质纤维化，提示ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ有潜力成为防治肾脏间质纤维化的一种新策略。 【关键词】 结缔组织生长因子；小分子干扰ＲＮＡ；肾纤维化；ｏｔ一平滑肌肌动蛋白 【中图分类号】 Ｒ ６９２ 【文献标识码】 Ａ 【文章编号】 １００２—７３８６（２０１２）０７—０９６７—０３ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ ｐｌａｓｍｉｄ ｏｎ ｒｅｎａＩ ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ ｗｉｔｈ ＵＵｏ ⅣＧ Ｙａｎｉｕｎ．Ｚ ⅣＧ Ｄｏｎｇｆｅｎｇ， Ｌｉｎｇ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＵｒｏｌｏｇｙ，Ｈｅｂｅｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈ￣ａｚｈｎａｎｇ０５００３１，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ （ＣＴＧＦ）ｏｎ ｒｅｎａｌ ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ ｗｉｔｈ ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ ｕｒｅｔｅｒａｌ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ（ＵＵ０）．ｔｈｒｏｕｇｈ ｃａｕｄａｌ ｖｅｉｎ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｔｏ ｔｒａｎｓｆｅｃｔ ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ ｐｌａｓｍｉｄ ｔｏ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｍｉｃｅ ｗｉｔｈ ＵＵＯ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌｓ ｗｉｔｈ ＵＵＯ ｗｅｒｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．ｔｈｅｎ ｔｈｅ ＣＴＧＦ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ １ｉｖｉｎｇ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｐｅｆｒｏｒｍｅｄ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆａ—ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ａｃｔｉｎ（ｏｔ—ＳＭＡ）ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｓｔａｉｎｉｎｇ；ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＣＴＧＦ ａｎｄ ０／．－ＳＭＡ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｂｙ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ；ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ—ＳＭＡ ｍＲＮＡ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｓｅｍｉｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＲＴ—ＰＣＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＣＴＧＦ ａｎｄ ｆｔ．一ＳＭＡ ｗｅｒｅ ｏｂｖｉｏｕｓｌＹ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＵＵＯ ｍｉｃｅ ｗｈｏ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ＣＴＧＦ．ｓｉＲＮＡ ｐｌａｓｍｉｄ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ ｐｌａｓｍｉｄ ｖｉａ ｃａｕｄａｌ ｖｅｉｎ ｉ ｎｊｅｃｔｉｏｎ ｃａｎ ｉｎｈｉｂｉｔ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｔｈｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＣＴＧＦ ａｎｄ ｏｔ．ＳＭＡ ｉｎ ｋｉｄｎｅｖ ｏｆ ｍｉｃｅ ａｎｄ ｃａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔ ｒｅｎａｌ ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．ｗｈｉｃｈ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ ｉｔ ｉｓ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ ｔｏ ｂｅｃｏｍｅ ａ ｎｅｗ ｗａｙ ｏｆ ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ ａｎｄ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｒｅｎａｌ ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ；ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ；ｒｅｎａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ；０【．ＳＭＡ 作者单位：０５００３１石家庄市，河北省儿童医院血液肾内科（杨艳 君、张东风、刘玲、王丽）；河北医科大学病理教研室（史永红） 通讯作者：张东风，０５００３１河北省儿童医院血液肾内科； Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｄｈ７８１２＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｅｎ 研究表明，结缔组织生长因子（ＣＴＧＦ）在。肾间质纤维化 （ＲＩＦ）的发生发展中居于重要地位 。因此，抑制ＣＴＧＦ表达 可能成为一种新的防治肾间质纤维化的方法。小分子干扰 河北医药２０１２年４月第３４卷第７期２．４ ＲＴ—ＰＣＲ结果Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１２，Ｖｏｌ ３４ Ａｐｒ Ｎｏ．７ 与Ｓｈａｍ组比较，ＵＵＯ＋Ｖ组 —ＳＭＡ ｍＲ— 外，很少表达 一ＳＭＡ。但肾间质纤维化时，肾间质细胞胞浆、肾 ＮＡ表达明显增加；与ＵＵＯ＋Ｖ组比较，ＵＵＯ＋ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ组 ｏ．／－ＳＭＡ ｍＲＮＡ的表达明显降低（Ｐ＜０．０５）。见表２，图４。 表２ ＲＴ—ＰＣＲ检测 —ＳＭＡ ｍＲＮＡ的表达ｎ＝８， ±ｓ 小管上皮细胞的基底侧，以及一些变性萎缩的小管上皮细胞胞 浆都可表达 一ＳＭＡ。在本实验中ＵＵＯ＋Ｖ组手术后７ ｄ时 ｏｔ—ＳＭＡ表达明显增加，广泛分布于肾间质细胞胞浆、肾小管上 皮细胞的基底侧，以及一些变性萎缩的小管上皮细胞胞浆，说 明ＵＵＯ＋Ｖ组出现明显的肾间质纤维化。ＵＵＯ＋ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ 注：与ＵＵＯ＋Ｖ组比较， Ｐ＜０．０５，＃Ｐ＜０ Ｏ１ 组手术后７ ｄ时肾间质细胞胞浆、肾小管上皮细胞的基底侧，以 Ｍ Ｓｈａｍ ＵＵＯ＋Ｖ【ｊＬｊ０＋ＲＮＡ 及一些变性萎缩的小管上皮细胞胞浆可见ｏｔ．ＳＭＡ阳性表达， ｎ ＳＭＡ ２７０ ｂｏ 但其表达量明显减少。这说明ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ质粒在小鼠体内明 显抑制了肾脏 一ＳＭＡ的表达。 ＧＡＰＤＨ ３２４ ｂｐ 总之，ＣＴＧＦ在肾脏间质纤维化过程中发挥至关重要的作 图４ ＲＴ－ＰＣＲ检测ｏｔ．ＳＭＡ ｍＲＮＡ的表达 用，利用ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ质粒敲低其表达能够显著抑制肾脏肾纤 ３讨论 维化的进展，为临床防治肾脏纤维化提供了实验依据及思路。 肾间质纤维化是多种肾脏疾病发展至终末期肾脏病的共 参考文献 同通路。细胞因子在肾间质纤维化中起重要作用 。其中 １卓文磊，王彦，张王景．针对ＣＴＧＦ的ｓｈＲＮＡ抑制ＴＧＦ￣Ｉ诱导人肾小 ＣＴＧＦ与肾问质纤维化关系密切。有研究指出，ＣＴＧＦ基因转染 管上皮细胞合成胶原．中国现代医学杂志，２００６，１６：９８１－９８４． ２ Ｌｕｏ ＧＨ，Ｌｕ ＹＰ，Ｓｏｎｇ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ 能诱导肾小管上皮细胞以肾小管上皮．肌成纤维细胞转分化机 ｂｙ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ｒｅｎａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｒａｔｓ ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ ｃｈｒｏｎ・ 制活化 Ｊ，所以ＣＴＧＦ可作为肾纤维化疾病干预治疗的靶 ｉｃ ａｌｌｏｇｒａｆｔ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ，２００８，４０：２３６５－ ２３６９． 目标。 ３ Ｃｈａｎ ＲＷ，Ｌａｉ ＦＭ，Ｌｉ ＥＫ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｙ ＲＮＡ干扰（ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ，ＲＮＡｉ）技术是一种新兴的基 ｏｎ ｔｈｅ ｍｅｓｓｅｎｇｅｒ ＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔａｒｇｅｔ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｕｒｉｎａｒｙ ｓｅｄｉｍｅｎｔ 因治疗技术，是发生于ｍＲＮＡ水平的转录后基因沉默技术。可 ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖｅ ｌｕｐｕｓ ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ．Ｎｅｐｈｒｏｌ Ｄｉａｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，２００６，２１： 在哺乳动物细胞组织内起到基因封闭作用，其结构稳定，无须 １５３４．１５４０． ４ Ｅｉｔｈｅｒ Ｆ．Ｆｌｏｅｇｅ Ｊ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ 像反义寡核苷酸那样进行广泛的化学修饰才能提高其半衰期， ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｆｉｂｒｏｓｉｎｇ ｒｅｎａｌ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｃｕｒｔ Ｏｐｉｎ Ｉｎｖｅｓｔｉｎｇ Ｄｒａｇｓ，２００５，６： 而且ｓｉＲＮＡ能在低于反义寡核苷酸几个数量级的浓度下，使靶 ２５５－２６１． 基因降至低水平甚至完全“敲除”，从而产生缺失突变型 ’ 。 ５ Ｚｈａｎｇ Ｃ，Ｍｅｎｇ Ｘ，Ｚｈｕ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｋｅｙ ｅｖｅｎｔｓ ｉｎ ｔｕｂｕｌａｒ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｔｏ ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｏｒ． 质粒表达型ｓｉＲＮＡ是目前进行ＲＮＡ干扰长期研究的最佳方 Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔ，２００４，２８：８６３－８７３． 法。本实验以ＣＴＧＦ为靶目标，构建质粒表达型ｓｉＲＮＡ，通过尾 ６谭金祥，任国胜．ＲＮＡ干扰技术的研究进展．重庆医学，２００５，３４： 静脉注射将其转染入小鼠体内，研究其对ＣＴＧＦ的抑制效应。 ２８２－２８５． 实验结果表明通过ＣＴＧＦ ｓｉＲＮＡ质粒能够明显抑制ＵＵＯ小鼠 ７ Ｂｍｍｍｅｌｋａｍｐ ＴＲ，Ｂｅｒｎａｒｄｓ Ｒ，Ａｇａｍｉ Ｒ．Ａ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｓｔａｂｌｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｈｏｒｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡｓ ｉｎ ｍａｍｍａｌｉｎａ ｃｅｌｌｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００２，２９６：５５０－ 。肾脏ＣＴＧＦ的表达，肾脏纤维化明显减轻。 ５５３． 在肾组织中仅－ＳＭＡ是肌成纤维细胞的特异性标志物 Ｊ， ８ Ｔｈａｎｎｉｃｋａｌ ＶＪ，Ｌｅｅ ＤＹ，Ｗｈｉｔｅ ＥＳ，ｅｔ ａ１．Ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｂｙ 是一种细胞骨架蛋白，在正常肾脏组织中除了血管平滑肌以 ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－－ｂｅｔａｌ ｉｓ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｏｎ ｃｅｌｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｔｅ－・ ｎ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｖｉａ ｆｏｃａｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｋｉｎａｓｅ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２００３，２７８：１２３８４． （收稿日期：２０１１—０８—２０） ・消 息・ 本刊对来稿推荐信及更改作者的要求 １．来稿必须附第一作者单位的推荐信，并加盖公章，只在稿件上盖章无效。 ２．介绍信的内容必须包括该作者的姓名及文题全称，并应说明：（１）稿件内容真实；（２）稿件内容不涉及保密；（３）无一稿两投； （４）作者署名及顺序无争议；（５）临床试验研究论文应注明患者知情同意。 ３．在稿件处理期间，因故增减作者或必须更改作者署名顺序者，变更前后所有作者签名，由原出具投稿推荐信的单位开具证 明，并加盖公章。 另外，论文若属国家自然科学基金项目或军队、部、省级以上重点课题，请写出课题号，并附由推荐单位加盖公章的基金或课题 证书复印件。 本刊编辑部