1.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做( ) A.鉴别培养基 C.选择培养基 答案 C
解析 选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。 2.可以分离并鉴定出分解尿素的细菌的方法是( ) A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红试剂 D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 答案 A
解析 尿素在尿素分解菌的作用下分解产生氨和CO2，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，酚红指示剂变红。
3.尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培养基时( ) A.葡萄糖在培养基中越多越好
B.尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮 C.尿素在培养基中越少越好
D.尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮 答案 D
解析 尿素既可以作为尿素分解菌的氮源，也可以作为其碳源，葡萄糖在培养基中并不是越多越好，葡萄糖过多会使培养基的渗透压过高，不利于尿素分解菌的生长繁殖，A错误；尿素分解菌没有固氮能力，故培养基中需要添加尿素作为氮源，B错误；添加尿素的目的是筛选尿素分解菌，其他微生物不能很好地生活在该培养基上，尿素在培养基中不是越少越好，过少就失去选择作用，过多又会使细胞失水死亡，C错误；尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮，D正确。
4.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( ) A一个细菌、液体培养基 C.一个细菌、固体培养基 答案 C
解析 菌落是一个细菌的子细胞群体，在固体培养基上形成，有一定的形态结构，肉眼可见(液体培养基中肉眼不可见)，菌落可作为菌种鉴别的重要依据，而多种细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态。
B.加富培养基 D.基础培养基
B.许多细菌、液体培养基 D.许多细菌、固体培养基
5.下列关于土壤取样的叙述，错误的是( ) A.土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤
B.先铲去表层土，选取距地表3～8 cm左右的土壤层 C.取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D.应在火焰旁称取土壤 答案 C
解析 土壤取样过程中，为防止杂菌污染，取样用的小铁铲和信封在使用前必须灭菌。 6.某同学对101、102、103倍稀释液中的细菌进行计数，平均菌落数分别为2 760、295和16，则样品中菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 mL)( ) A.2.76×104个/mL C.4.6×104个/mL 答案 B
解析 为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300间的平板进行计数，因此只有295符合要求，其稀释倍数为102，所用稀释液体积为0.1 mL，套入计算公式得样品中菌落总数为2.95×105个/mL。
[能力提升]
7.在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是( )
①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ②从土壤中分离出能够分解氨的细菌 ③统计每克土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌 ④统计所取土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌 A.①③ C.①② 答案 A
解析 从土壤中分离分解尿素的细菌并对其计数，统计的是每克土壤样品中含多少分解尿素的细菌，用公式“每克样品中菌株数＝(C/V)×M”进行推测，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 8.给无氮培养基接种土壤稀泥浆的正确方法是( )
A.打开培养皿盖，取一根接种环沾取少许稀泥浆，轻轻地点接在培养基的表面上
B.取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后沾取少许稀泥浆，略微打开培养皿盖，在培养基的表面轻点
C.打开培养皿盖，取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后沾取少许稀泥浆，在培养基的表面轻点
D.略微打开培养皿盖，取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌，冷却后沾取少许稀泥浆，在培养
B.2.95×105个/mL D.3.775×104个/mL
B.②④ D.③④
基的表面轻点 答案 D
解析 接种过程中要防止外来杂菌的入侵，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将接种环在火焰上灭菌，冷却后沾取少许稀泥浆，在培养基的表面轻点，用未冷却的接种环沾取稀泥浆会杀灭菌种。
9.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是( )
A.链霉素能阻止结核杆菌的生长 B.链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效 C.链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效 D.链霉素可以用于治疗伤寒病人 答案 D
解析 分析题图可知，该培养基是含有链霉素的选择培养基，接种的三种细菌中，霍乱菌和结核杆菌都可以被杀灭，并且链霉素对结核杆菌杀灭的有效程度大于对霍乱菌的有效程度，而伤寒菌的生长不受影响，所以选项D错误。
10.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( ) A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨固体培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养
D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 答案 D
解析 检测土壤中细菌总数的实验中，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，A项正确；取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于不同的平板上，B项正确；接种后要将培养皿倒置，置于37 ℃恒温培养，C项正确；在确定对照组无菌后，应选择菌落数在30～300之间的平板进行计数，D项错误。
11.广东省是我国甘蔗生产区之一。甘蔗是一种高光效的C4植物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗→榨汁(蔗糖)―→酵母发酵→蒸馏→成品(燃料酒精)。
(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下： 步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意_________________和__________，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。 步骤4：根据____________________，筛选出突变菌。
(2)上述步骤2、3和4的依据分别是___________________________________________。 答案 (1)添加高浓度蔗糖(葡萄糖) 调低pH 是否能在选择培养基上生长 (2)提供高糖和酸性的筛选环境；获得单菌落；能生长的菌落具有耐高糖和耐酸的特性
解析 (1)要筛选耐高糖和耐酸的菌种，培养基中必须加入高浓度蔗糖和调低pH，能在选择培养基上生长的即为所需菌种。(2)步骤2是给其提供高糖和酸性的筛选环境；步骤3是为了获得单菌落；步骤4是根据能生长的菌株具有耐高糖和耐酸的特性筛选出突变菌。 12.请回答下列有关微生物的问题：
(1)微生物的分布：微生物主要分布在富含__________的土壤表层；不同微生物对pH的要求不同，细菌常生活在酸碱度____________的潮湿土壤中。
(2)微生物的消毒和灭菌：在微生物培养中，对培养基常用______________法进行灭菌。如果要检测灭菌是否彻底，可以采用的方法是______________________________________。 (3)微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式：______________________________________________。在果醋制作时，运用醋酸菌在____________和糖源充足的条件下，将糖分解成醋酸。 (4)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是__________和______________。 (5)微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的____________(填“选择”或“鉴别”)培养基中加入_____________指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变___________色。
答案 (1)有机质 接近中性 (2)高压蒸汽灭菌 将灭过菌的培养基在适宜的温度下放置一段酶时间，观察培养基上是否有菌落产生 (3)C6H12O6――→2C2H5OH＋2CO2 有氧 (4)平板划线法 稀释涂布平板法 (5)选择 酚红 红
解析 (1)微生物主要分布在有机质丰富的土壤表层，细菌常生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中。(2)对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；可通过在适宜的温度下放置灭过菌的培养基，看其是否有菌落产生来确定培养基灭菌是否彻底。(3)醋酸菌为需氧型微生物。(4)最常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(5)用选择培养基筛选目的菌——尿素分解菌，加入酚红指示剂，若存在尿素分解菌，指示剂将变红色。
[真题体验]
13.(2017·全国Ⅰ，37)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：
(1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是______________________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_______________________(答出两点即可)。 (2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择___________________(填“尿素” “NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是____________。 (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_______________ _____________________________________________________________(答出两点即可)。 答案 (1)脲酶 分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物 为细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料 (2)尿素 其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用 (3)为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定
解析 (1)细菌分解尿素是由于细菌体内能合成脲酶，尿素是有机物，分解尿素的细菌是分解者，属于异养型生物，因此不能利用CO2作为碳源合成有机物。葡萄糖通常既作为碳源，也作为能源。(2)筛选分解尿素的细菌，通常只能用尿素作为唯一氮源，“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”均含有无机氮源NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用。(3)KH2PO4和Na2HPO4可为微生物提供P元素和无机盐离子如钾离子和钠离子，还可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定。
14.(2016·四川，10)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。请据图回答下列问题：
(1)图中选择培养基应以__________为唯一氮源；鉴别培养基还需添加__________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成________色。 (2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是__________________，每克土壤样品中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较________。
(3)现有一菌株产生的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示的位置增加了70个核苷酸，使图乙序列出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中，终止密码为_____，突变基因表达的蛋白质含_____个氨基酸。 答案 (1)尿素 酚红 红 (2)稀释涂布平板法 1.75 少 (3)UGA 115
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