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土壤过氧化氢酶活性测定方法(完整)

来源:小奈知识网
高锰酸钾滴定法

1. 试剂配制:

(1)0.3%过氧化氢溶液: ①(1:100 30%的H2O2和水) ②2O2+49.5ml蒸馏水)

③(1ml30% H2O2+99ml蒸馏水) (2)3N硫酸:(10ml硫酸+50ml水) 4+100ml蒸馏水) 2. 高锰酸钾的标定:

精确称取约0.2 g在110℃湿润至恒量的基准草酸钠.参加250 mL新煮沸过的冷水.10 mL硫酸,搅拌使之消融.将草酸钠溶液加热到75℃~ 85℃ (即开端冒蒸气时的温度),趁热用待标KMnO4 溶液进行滴定.开端滴准时反响速度很慢,待溶液中产生M n后,反响速度加速,但滴准时仍必须是逐滴参加,至溶液呈粉红色,半分钟内不褪色即为终点.留意滴定停止时的温度不该低于60℃. 2MnO4+ 5C2O4 + 16H75~ 85℃ Mn +10CO2 + 8H2O.

参考:《高锰酸钾尺度溶液标定办法的改良及留意事项》王继莲 3. 测定:

-

2-+

2+

2+

精确称取2 g风干土置100 mL锥形瓶→参加40 mL蒸馏水和5 mL0.3%过氧化氢(现配),另设对比 (40 mL蒸馏水和5 mL0.3%过氧化氢)→在来去式振荡机上振荡20 min→参加5 mL3N硫酸(以稳固未分化的H2O2)→用慢速型滤纸过滤,→ 4.成果盘算

泥土的过氧化氢酶活性,以单位土重的0.1N KMnO4毫升数(对比与实验测定的差) 暗示. 备注:

以容量法测H2O2的酶活:Kappen(1913)起首介绍硫酸存鄙人用高锰酸钾滴定残剩的过氧化氢测定酶活.此法依据H2O2与泥土互相感化时,未分化的H2O2的数目用容量法(经常应用高锰酸钾滴定未分化的H2O2)测定H2O2的酶活

2 KMnO4+5H2O2+3H2SO4→2MnSO4+K2SO4+8H2O+5O2

泥土H2O2酶促过氧化氢的分化有利于防止它对生物体的迫害感化.

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