豆制品中大豆异黄酮的含量比较

华西药学杂志·　ｌ２１（３）：３０５　３０６　　Ｊ　～　ＷＣＪＰＳ　２００６。１．２．５与高效液相色谱的检查结果比较根据《国　际药典》方法，并对色谱柱、柱温、流速等色谱条件进　行优化，采用Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８柱（１５０　ｌ／ｌｌｎ×４．６　ｌ／ｌｌｎ，５　／ａｎ），流速０．６　ｍｌ·ｍｉｎ～，检测波长２１６　ｎｎｌ，柱温　２５￣Ｃ，流动相Ａ为乙腈，流动相Ｂ为水，梯度洗脱程　序０—１７　ｍｉｎ（Ａ相６０％），１７～３０　ｍｉｎ（Ａ相６ｏ％一　１０ｏ％）。　２讨论　《中国药典》使用硅胶Ｇ薄层板，以苯一乙酸乙　酯（８０：２０）为展开剂，以２％的香草醛硫酸溶液为显　色剂『３。国际药典使用硅胶Ｇ薄层板，以石油醚一　３］乙醚（５０：５０）为展开剂，用５％香草醛硫酸溶液为显　色剂。结果后者方法未检出有关物质，前者仅检出　个有关物质，文中的方法可以检出两个有关物质，　可见优于《中国药典》和《国际药典》收载的薄层色谱　法。样品通过降解实验，发现两个有关物质在碱性　条件下均增多，可能是双氢青蒿素的碱解产物，其化　学结构尚待进一步确证和研究。　样品对光不稳定，配制好的供试液应立即点样　＾　一　¨——　——　一　展开，展开过程中注意避光，否则双氢青蒿素会降　解，使有关物质检查的结果不准确。　参考文献：　［１］　《全国中草药汇编》编写组编．全国中草药汇辑［Ｍ］，北京：人　民卫生出版社，１９７５．４８２．　０　５　１０　１５　ｔ／ｒａｉｎ　２０　２５　３０　圈１双氲青蒿鬃中有关物质的Ｉ－ＩＰＬＣ色谱圈　ＦＩｇ１　Ｉ－ＩＰＬＣ　ｅｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆｔｈｅ　ｒｅｌａｔｅｄ跚ｂｓｔ雌懈Ｉｎ　ｍｍｌｌ　精密称取双氢青蒿素供试品适量，用乙腈一水　（８：２）溶解并稀释成１０　ｍｇ·ｍｌ　的溶液，进样２０　ｌ，　记录色谱图（图１）。在５．２　ｍｉｎ和６．２　ｍｉｎ处有两个　［２］　章元琅．徐懋丽．章丽珠，等．还原青蒿素衍生物的合成及其抗　血吸虫作用［Ｊ］．医药工业，１９８５：１６（６）：１４—１５，　有关物质峰，其面积为总面积的０．０２％和０．７％，和　新建立的薄层色谱法检查结果基本一致。　［３］　中华人民共和国国家药典委员会．中国药典［Ｓ］．二部．北京：　化学工业出版社，２ｏ０５．５７．　收稿日期：２ｏ０５—１Ｏ　豆制品中大豆异黄酮的含量比较　史桂玲　，马欣　，杨军　，孙家莉　（１．天津市人民医院，天津３００１２１；２．天津市医药科学研究所，天津３ｏｏｏ７０）　摘要：目的考察豆源性物质（几种食品及下脚料）的大豆异黄酮的含量。方法将豆源性制品和下脚料干品进行提取、分　大豆异黄酮含量依次为：豆水＞豆腐＞豆粕　离，用ＴＬＣ鉴别后再以染料木素为对照品，在２５８　ｎｍ处用ｕｖ法测定含量。结果＞豆芽＞大豆＞豆豉＞豆浆＞豆渣。结论豆源性下脚料豆水、豆粕和豆渣均含有一定量的大豆异黄酮，尤其豆水和豆粕是　很好的大豆异黄酮原料。另外，豆源性食物中大豆异黄酮含量的比较也为人们饮食提供了依据。　关键词：下脚料；豆源性物质；提取；大豆异黄酮；紫外分光光度法　中图分类号：Ｒ２８２，Ｒ９１７　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００６—０１０３（２００６）０３—０３０５一ｏ２　大豆异黄酮（ｓｏｙｂｅａｎ　ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅｓ）是豆科植物的　重要化学成份，在大豆中有１２种，含量在０．２５％左　性物质中大豆异黄酮的提取、分离和含量测定进行　了研究。　右。其中主要有染料木素及其苷（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ，ｇｅｎｉｓｔｉｎ）　和大豆苷元及其苷（ｄａｉｄｚｅｉｎ和ｄａｉｄｚｉｎ）【１　Ｊ两种。大　１实验部分　１．１试剂和仪器　豆异黄酮苷元的生物活性及生物利用率都高于　苷［引。研究表明，大豆异黄酮的化学结构与雌激素　对照品染料木素（西安奥塞斯生物技术有限公　司，纯度为９８％）；大豆苷元（中国药品生物制品检　十分相似　３，能够与雌激素受体结合，对雌激素水平　起到双向调节作用，从而起到预防、治疗相关疾病的　作用【４，５　Ｊ。为优化大豆异黄酮来源，现将８种豆源　作者简介：史桂玲，（１７０一）９女，天津，主管药师，从事医院药房工作。　定所），其他试剂均为分析纯。ＵＶ一２６０紫外一可见　光自动记录分光光度仪（日本岛津公司）；ＫＱ一１００　维普资讯 http://www.cqvip.com

３０６　华西药学杂志　裹１豆源性物履ｉ干品中大豆异黄酮的含量比较　第２１卷　型超声波清洗器（江苏省昆山市超声仪器有限公　司）；硅胶预制板（自制）。　样品　原料干品／．ｇ提取物鼍／ｍｇ　提取物中／％　原料干品中／‰　１．２方法与结果　１．２．１样品的采集与制备豆腐、豆浆、豆芽、淡豆　豉和大豆均为市售，豆腐和豆芽晾干后，８０￣Ｃ烤干备　用；豆水和豆渣蒸干备用；大豆和淡豆豉磨成粗粉　后，过１０—２０目筛备用。　１．２．２大豆异黄酮的提取ｌ６　Ｊ称取“１．２．１”项下样　品各２．５　ｇ，用ｌ０倍量８０％乙醇加热回流１　ｈ后，超　声提取３０　ｍｉｎ，过滤，滤渣中再加１０倍量８０％乙醇，　超声提取４０　ｍｉｎ，合并两次提取滤液，回收乙醇至提　取物无醇味，加石油醚除脂。分离出水层，用等量的　乙酸乙酯萃取３次，弃去水层，合并乙酸乙酯萃取　液，回收大部分乙酸乙酯，待析晶，滤出析出物，干燥　称重。得各样品提取所得的大豆异黄酮（表１）。　１．２．３　ＴＩＥ检查取“１．２．２”项所得各提取物粉末　和对照品染料木素及大豆苷元各１　ｍｇ，加３　ｒｎｌ　９５％　乙醇使溶解，用毛细管分别点于硅胶ｃ预制板上。　以氯仿一甲醇一水（６５：２４：４）为展开剂，展开，取出，　晾干，于碘蒸气中显色。各豆源性物质的提取物在　染料木素和大豆苷元对应位置均有对应斑点。　１．２．４测定波长的选择【７　Ｊ将各提取物样品及对　照品染料木素和大豆苷元用蒸馏水配制成适当的浓　度，在２００～４００　ａｍ进行扫描。除豆豉提取物　在　４２８　ａｍ外，其余均在２５８　Ｏ　０　Ｏ　Ｏ　０　Ｏ　Ｏ　Ｏ　ａｍ左右，因此选择２５８　ａｍ　为测定波长。　ｌ昙　ｍ　ｍ　１．２．５标准曲线的制备精密称取染料木素对照　品５．１３　ｍｇ，置２５　ｒｎｌ量瓶中，用９５％乙醇溶解并定　容，摇匀。分别精密吸取０．０５、０．１０、０．１５、０．２０、　０．３０、０．０４　ｍｌ，分别置ｌ０　ｒｎｌ量瓶中，并各加乙醇１．０　ｒｎｌ，再加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，在２５８　ａｍ处测得　吸光度。以吸光度对浓度绘制标准曲线，得回归方　程：Ｙ＝６．６×１０　（ｒ＝０．９９９１），在１０—８０　ｇ·ｒｎｌ－１　范围内线性关系良好。　１．２．６样品中大豆异黄酮的测定精密称取各提　取物粉末（大豆５．１２　ｍｇ、豆豉５．１３　ｍｇ、豆粕５．１０　ｍｇ、豆腐５．１４唱、豆芽５．０５　ｍｇ、豆渣５．０５　ｍｇ、豆浆　５．０３　ｍｇ、豆水５．１２　ｍｇ），分别置２５　ｒｎｌ量瓶中，以　９５％乙醇溶解并定容，摇匀。分别精密吸取上述溶　液各０．３　ｌＩｌ，分置ｌ０　ｌＩｌｌ量瓶中，加９５％乙醇１．０Ⅱｌｌ，　再用蒸馏水定容，摇匀，在２５８　ＩＩＩＩ１测吸光度并计算　含量（表１）。结果显示，各豆源性物质干品均含大　豆异黄酮，其含量顺序为豆水＞豆腐＞豆粕＞豆芽　＞大豆＞豆豉＞豆浆＞豆渣。　豆水２．５　３３．０６　３７．９８　豆腐２．５　２９．６ｌ　３５．６８　豆粕２．５　３６．６８　２５．６ｏ　豆芽２．５　３３．６５　２５．３Ｏ　火或２．５　１８．６ｌ　３４．０５　豆豉２．５　１　６＋３１　３２．４９　豆浆２．５　１Ｃ　．７５　２８．１６　疆滴２．５　１．ｔ钉　２０．９２　２讨论　文献［６ｊ用８０％乙醇回流提取两次（每次１．５　ｈ），因提取时间较长，我们根据异黄酮热溶于稀醇的　性质，采取常规加热提取和超声相结合的方法，即先　用８０％乙醇回流１　ｈ，再超声提取两次（３０、０４　ｍｉｎ）。　文献报道大豆异黄酮是包含１２种异黄酮结构　的物质，最主要的是染料木素（５，７，４　一三羟基异黄　酮）及其苷。因此选用染料木素作为Ｕｖ法测定用　对照品。　豆源性物质都含有大豆异黄酮，但含量高低不　等。豆水、豆粕、豆渣等．都属豆源性下脚料，异黄酮　含量（以干品计）豆水＞豆粕＞豆渣。被倒掉的豆水　蒸干后其异黄酮含量比同等重量大豆高出近一倍。　所以废弃的豆水可以用作：提取大豆异黄酮的原料。　豆源性食物（干品）异黄酮岔量排序为豆腐＞豆芽＞　豆豉＞豆浆，这不仅为我们提供了饮食依据，也可作　为大豆异黄酮的原料来源。　参考文献－　［１］　孙家莉．大豆异黄酮的抗癌作用［Ｊ］．天津药学，２００１，１３（２）：　ｌＯ—ｌ２．　［２］　毛峻琴。宓鹤呜．大　异黄酮的研究进展［Ｊ］．中草药，２ＯＯＯ，３１　（１）：６１—６４．　［３］　Ｓｅｔｅｈｅｌｌ　Ｋ，Ｐｈｙｔｏｅｓｍ￣ｎｓ．Ｔｈｅ　ｂｉｏｅｈ￣ｔｉｓｔｒｙ，ｐｈｙｓｉｏｌｏ￣，ａｎｄ　ｉｍｐｌｉｅａ－　ｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｈｕｍａｎ　ｈｅａｌｔｈ　ｏｆ　ｓｏｙｉｓｏｆｌａｖｏｎ．ｅｓ［Ｊ］．Ａｍ　ＪＣｌｉｎＮｕｔｒ，１９９８，６８　（ｓｕｐｐ１）：１３３３—１３４６．　［４］　那晓琳，崔洪斌．大豆异黄酮类雌激素作用与预防骨质疏松研　究进展［Ｊ］．中国骨质疏松杂志，７＿Ｏ０２，８（４）：３７０—３７１．　［５］　龙锐，孙伟，　Ｅ蓓，等．大豆异黄酮片对正常小鼠生长和免疫　的影响［Ｊ］．华西药学杂志，２０Ｏ６，２１（２）：１５０—１５２．　［６］　马桂芝，云琦，高晓黎．大豆中大豆异黄酮提取工艺的研究　［Ｊ］．中成药，２００２（１１）：８　ｊ一８３０．　［７］　张玉梅，孙学斌，高旭年，等．紫外分光光度法测定大豆总异黄　酮的含量［Ｊ］．中国食品卫生杂志，２Ｏ０Ｏ，１２（４）：７—９．　收稿日期：２００５—１２