塞 堡笠 １．４ 与典型枪弹损伤的鉴别 行行凶过程的重建，以便刑事技术＿Ｔ作更好地服务于 诉讼。 参考文献： 在典型枪弹损伤过程中，人体组织受到高速旋转 的弹头冲击、碰撞［＝】］，其创口、创腔、创道具备火器伤 的特征，例如：中央皮肤缺损、擦拭轮、挫伤轮、火药烟 晕、火药颗粒等。而本组研究的螺丝刀刺击头部属于 Ｅｌｌ赵子琴．法医病理学（第３版）ＥＭ］．北京：人民卫生出 版社，２００４：１２２ １２５． 相对低速运动的物体冲击、碰撞人体组织，其创口、创 腔、创道均不具备火器伤的特征。 ５４例中，经开颅手术治疗后４８小时内死亡的２８ 例，４８小时以外死亡的１１例；未经治疗当场死亡的 ｌ５例。脑组织机械性损伤局限于创道，脑组织创道 ［２１兰满生．同人颅骨颞区的观察测量［Ｊ］． 牛职业教育， ２００６，１（２４）：１５９． ［３］ 肖平．螺丝刀致颅脑损伤死亡１例［Ｊ］．河南科技大学 学报（医学版），２００７，３（２５）：６３． ［４］杨增林．螺丝刀损伤特征２例［Ｊ］．刑事技术，２０００（４）： 呈肓管状，创道周边脑组织挫伤。 ２讨论 笔者认为，男性施暴者５２例（９６．３ ），年龄ｌ８～ ４８岁，平均年龄３２．８岁；女性施暴者２例。这反映出 该年龄段男性在面临社会生活中的矛盾冲突时较女 性更加易于在激情状态下选择使用广泛的常见工具 采取暴力行为。 较光滑的螺丝刀体部刺人颅腔时，在头皮创口边 缘形成的挫伤带可不明显；陈旧的或已生锈的螺丝刀 体部较粗糙，刺人颅腔时，在头皮创口边缘形成的挫 伤带较典型，甚至可见锈迹附着于头皮移行部。螺丝 刀尖端刺破颅骨进人颅腔后阻力减小，当刺击力度较 大螺丝刀体部小于头颅直径时，可在头皮上检见螺丝 刀柄部与头皮接触形成的类圆形压迹。颞区颅骨为 颅骨各部位最为薄的区域，根据学者兰满生等的测 量，中同人颞骨鳞部最薄处有的仅为０．１ｍｍ，呈半透 明状，面积呈片状或斑点状分布，其平均厚度约为 １．４６ｍｍ￣４．７１ｍｍ之间ｌ２。本组巾给被害人造成的 致命性损伤多分布于颞部（９２．６ ），缘于当施暴者挥 动持有螺丝刀的手臂时，使螺丝刀获得相应动能而处 于相对低速运动状态，刺击被害人头颅时，当螺丝刀 尖端作用于颅骨较厚的额部、顶部、枕部时，需克服较 大阻力才能够进人颅腔，故存颅骨较厚的区域形成的 损伤多局限于颅骨骨板；当螺丝刀尖端作用于较为薄 弱的颞区时更易于刺破颅骨进入颅腔，造成致命的脑 组织损伤。 笔者认为螺丝刀刺击方向与头颅在创口处的切 面成角能够反映施暴者在行凶时与被害者的位置关 系，在较为接近直角刺人的情况下其创道深度与螺丝 刀体部的长短、创口区域颅骨骨板厚度及螺丝刀具有 动能相关联［３ ］。故检案时不仅仅要明确死亡原冈， 须根据头皮损伤、颅骨损伤、脑组织损伤的形态学特 点，综合判断尸体的致伤情况等。法医工作者在此类 检案中，其死亡原因往往显而易见，而我们应当对头 皮及头皮下软组织不同程度的损伤形态、创道方向、 颅骨损伤形态等仔细分析，在认定致伤工具的同时进 ４６． 收稿日期：２０１４－０６—１０ 利用自研新型脱落细胞粘 取器提取接触类检材ＤＮＡ 赵春鹤 ，郭业明 ，江煜灵 ，陈红英 ，袁家龙 （１．广 东东莞市公安局，广东东莞５２３００８；２．广东省公安厅刑事 技术中心，广东广州５１００００） 关键词：脱落细胞粘取器；接触；检材载体；ＤＮＡ；Ｓ，ｒＲ 中图分类号：ＤＦ７９５．２ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００８—３６５０（２０１４）０４ ００５１ Ｏ３ 随着社会知识整体水平的提升及传媒技术的迅 速发展，犯罪分子的作案手段不断的科技化、多元化， 犯罪现场的高度破坏使留下的有用的破案线索越来 越少，因此刑事技术鉴定面临的形式越来越严峻。近 年来，犯罪分子对ＤＮＡ检验技术也有了一定了解和 认知，肉眼可见的血迹、唾液斑可能会被犯罪分子破 坏，因此要加强接触类检材ＤＮＡ鉴定能力，为破案 提供线索。随着案件量的增多，接触类生物检材在实 际检案中所占的比例越来越大Ｌ１ｊ。 接触类检材即与人体接触后有人体的生物样本 （脱落细胞）残存的检材。其特点是：载体大，易污染， 易降解，ＤＮＡ含量少，很难将载体上的ＤＮＡ有效地 进行富集等。另外，接触性检材接触细胞量的多少受 接触人皮肤的十湿程度、接触的力度、时间等多种因 素影响，不同类型甚至同一类型的接触性检材提取的 ＤＮＡ量差别也很悬殊［２］。为此，法医生物学实验室 一直在探索有效的接触性检材ＤＮ人提取工具和检 验方法，比如汗潜指印ＤＮＡ提取方法的研究等Ｌ３］。 本实验室利用粘取法原理开发设计了一款脱落细胞 粘取器（专利号：ＺＬ ２０１３ ２０２２８７５４．３）。它是利用膜 片的粘性直接粘取接触性检材载体表面的脱落细胞， 主要Ｆ｝１弹性手柄、基底膜、粘取膜、保护膜、同定膜构 ・ ５１ ・ 成，各层膜依次设置存弹性手柄的一端。其特点是弹 性手柄形变能力好，可随着脱落细胞附着载体的形状 而发生改变，适用于各种特殊形状载体粘取脱落细 胞，同时粘取膜粘附脱落细胞能力强，对于大面积载 体，可多次粘取，具有富集脱落细胞的作用。 本文中介绍的是利用粘取器粘取的方法，成功收 集到粘附在衣服袖口、剪刀柄、水杯、手表，手套、鞋 带、拖鞋等２０多份不同载体表面的脱落细胞（见表 １），报道如下。 １材料与方法 １．１ 样 本 手机１部、瓷杯１个；眼镜２个；桌面指纹１个； 矿泉水瓶６个；螺丝刀１把；电源开关１个；光面书皮 ｌ张；打火机２个；笔１支；门锁１个；纤维手套１个； 乳胶手套２只；钥匙１把；皮质拖鞋１只；无纺布口罩 １个；警卫棒１支；木棒１根；衣服袖口２个。 １．２ 方 法 １．２．１脱落细胞的采集 清洁实验台面，每做一种 检材铺一层一次性台布，将检材放好，实验人员戴好 手套、口罩和帽子。根据检材大小，选择合适大小粘 取器。手握粘取器弹性手柄，用专用撕膜镊去掉最外 层的塑料保护膜，露出膜片粘性面，用来粘取脱落细 胞存在处。每个可疑处用力粘取ｌ０次，并尽可能将 所有可能存有脱落细胞的地方粘到。粘取到检材的 粘取器放回特制包装盒中，并做好标记。 １．２．２ ＤＮＡ提取准备好离心管，用撕膜镊（脱落 细胞粘取器专配）撕下粘有脱落细胞的膜片放入离心 管，用ＬＣ一超微磁珠法ＤＮＡ提取试剂盒（长春博坤） 及Ｔｈｅｒｍｏ ＫｉｎｇＦｉｓｈｅｒ磁珠核酸提取纯化仪（长春博 坤）进行提取纯化。３０ｂｄ 水洗脱，获得ＤＮＡ溶液。 １．２．３ ＰＣＲ－ＳＴＲ检测 Ｌ 超微磁珠法ＤＮＡ提取 试剂盒及Ｔｈｅｒｍｏ ＫｉｎｇＦｉｓｈｅｒ磁珠核酸提取纯化仪 进行提取纯化后，采用Ｐｒｏｍｅｇａ １８试剂盒在９７００型 扩增仪上进行ＰＣＲ反应：扩增反应体系１０ Ｉ ，其中 模板４ Ｌ ＰＣＲ ｂｕｆｆｅｒ（ｍｉｘ：ｐｒｉｍｅｒ一２：２比例配 制）、去离子水２ Ｉ 、ＤＮＡ模板４／￣Ｌ；扩增条件根据试 剂盒操作手册设置。扩增产物经３１３０ＸＬ遗传分析 仪检测，ＧｅｎｅＭａｐｐｅｒｌＤ ｖ３．２软件进行ＳＴＲ分型，电 泳条件按说明书进行。 ２结果与讨论 检验结果见表２。 表２结果表明，运用新型脱落细胞弹性粘取器在 上述接触类检材巾：６９ 的检材获得完整ＳＴＲ图谱， ８．５ 的检材获得可用来分析比对图谱，只有８．５ ９／６ 未得到ＳＴＲ分型。 ・ ５ ・ 型童垫 箜 塑 表２各种载体接触ＤＮＡ＿ＳＴＲ检测结果 注：■表示图谱 接触ＤＮＡ类检材由于其所含有的ＤＮＡ量接近 低拷贝模板（１ｏｗ ｃｏｐｙ ｎｕｍｂｅｒ，ＬＣＮ，是指ＤＮＡ含量 少于１００ｐｇ），极易因环境、各种原因破坏、检材陈旧、 提取人防护不当等造成ＤＮＡ降解或人源污染。因 此能否从情况复杂的含有微量ＤＮＡ的接触性检材 上获得有价值的ＤＮＡ图谱是检验成功的关键。本 文接触性检材经过脱落细胞粘取器粘取，磁珠法 ＤＮＡ提取试剂盒与ＫｉｎｇＦｉｓｈｅｒ磁珠纯化仪提取、纯 化，经ＳＴＲ分型检测多数获得可靠ＳＴＲ图谱ｌ４ｊ。而 本实验室近３年来应用常规方法对同类接触性检材 进行ＤＮＡ提取检验时，仅对长期接触类检材（如眼 镜、瓷杯、手机等）能够检测出有效ＤＮＡ，且此类样本 的检出率不足５Ｏ ；一过性或短暂接触类检材ＤＮＡ 检出率不足５ 。 本文中使用的脱落细胞粘取器针对接触性检材 所附着的载体特点专门设计，其特点为：（１）防污染， 每个粘取器均有特制的包装盒，并可在包装盒上记录 检材信息。（２）精致小巧，操作简便。（３）便于保存和 送检。（４）２种型号，根据检材载体大小具体选择。 （５）提取膜片粘性好，脱落细胞转移成功率高；同时粘 片可直接进行ＤＮＡ提取，粘片本身的韧性和形状使 ＤＮＡ提取操作更加方便。（６）弹性手柄，便于凸凹不 平载体表面、细小载体及角落的粘取使用。 综上所述，本文介绍的利用脱落细胞粘取器粘取 脱落细胞方法简单，富集脱落细胞能力强，适用检材 类型广，同时配合高效的ＤＮＡ提取纯化方法和灵敏 度高ＳＴＲ扩增和电泳检测手段，为提高接触性检材