山西医药杂志２０１０年１１月第３９卷第１１期上半月 Ｓｈａｎｘｉ Ｍｅｄ Ｊ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１０，Ｖｏ１．３９，Ｎｏ．ＩＩ ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ 鞘内注射盐酸奈福泮和吗啡对切口痛大鼠 脊髓ｃ—ｆｏｓ表达的影响 太原市人民医院（０３０００１） 郑晓冬 山西医科大学第一医院 程桥 【摘要】目的探讨在大鼠切口痛模型中鞘内注射奈福泮与吗啡在脊髓水平的抗伤害作用以及对脊髓 雄性ＳＤ大鼠８５只，分为对照组、不同剂 ｃ－ｌｏｓ表达的影响，并且测量二者相互作用时的半效剂量（ＥＤ ）。方法量奈福泮（５Ｏ～１５０ ｇ）组、不同剂量吗啡（３～ｌｏ ｇ）组进行术前鞘内注射以获得量效曲线及ＥＤ５。值；切口术前鞘 内同时注射奈福泮和吗啡不同比例的ＥＤｓ。以观察联合用药时的ＥＤｓ。值。按Ｂｒｅｎｎａｎ法制成大鼠切口痛模型，采 用累积疼痛评分法观察疼痛的行为学变化，以免疫组织化学法测量ｃ－ｌｏｓ含量。结果 与对照组比较，术前奈福 泮、吗啡治疗组和奈福泮＋吗啡治疗组大鼠在术后１ ｈ累积疼痛评分均明显降低（Ｐ＜Ｏ．Ｏ５）；在Ｉｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ图中 可见奈福泮与吗啡合用时的累积疼痛评分实测值明显落在理论累加等效线的下方，且９５ 可信区间不与理论累 加点重合。与假手术组比较，对照组大鼠脊髓背角ｌｏｓ样免疫活性（ＦＬＩ）阳性神经元表达明显升高（Ｐ＜Ｏ．０１）；与 对照组比较，术前奈福泮、吗啡治疗组和术前奈福泮＋吗啡治疗组脊髓背角ＦＬＩ阳性神经元数目明显降低（Ｐ＜ ０．０５），１／２ＥＤ 。量的两药联合用药的抑制百分比均比ＥＤ 。量的两药单用的抑制百分比大（Ｐ＜０．０５）。结论在 大鼠切口疼痛模型中，术前鞘内注射奈福泮和吗啡能抑制脊髓内ｃ—ｆｏｓ基因的表达，能产生量效相关的抗伤害作 用，奈福泮与吗啡联合用药能产生协同作用。 【关键词】奈福泮； 吗啡； 鞘内注射； ｃ—ｌｏｓ基因； 累积疼痛评分 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ ｎｅｆｏｐａｍ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｏｎ ｓｐｉｎａｌ ｃ－ｌｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｎｃｉｓｉｏｎａｌ ｐａｉｎ ＺＨＥＮＧ Ｘｉａｏ—ｄｏｎｇ ，ＣＨＥＮＧ Ｑｉａｏ． Ｔａｉｙｕａｎ Ｐｅｏｐｌｅ ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｘｉ ０３０００１，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃ－ｆｏｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｉｎｔｒａｔｈｅｅａｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｆｏｐａｍ ａｎｄ ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｎｃｉｓｉｏｎａｌ ｐａｉｎ，ｔｏ ｓｕｒｖｅｙ ｔｈｅ ＥＤ５０ ｏｆ ｔｗｏ－ｗａｙ ｉｎｔｅｒ— ａｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｉｇｈｒｙ－ｆｉｖｅ ｍａｌｅ ＳＤ－ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｉｎｔｏ ｓｅｖｅｒａｌ ｇｒｏｕｐｓ．ＮＳ，ｎｅｆｏｐａｍ（５Ｏ～１５０ ｇ）ａｎｄ ｍｏｒｐｈｉｎｅ（３ １０ ｂｔｇ）ｗｅｒｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｔｈｅ ｄｏｓｅ－ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｕｒｖｅ ａｎｄ ｔｈｅ ＥＤ５０ ｖａｌｕｅｓ；ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ＥＤ５０ ｖａｌ— ｕｅｓ ｗｅｒｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌｌｙ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ＥＤ５。ｏｆ ｄｒｕｇ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｂｒｅｕ— ｎａｎ．Ｐａｉｎ ｂｅｈａｖｉｏｒ ｗａｓ ａｓｓｅｓｓｅｄ ａｔ １ ｈ ａｆｔｅｒ ｉｎｃｉｓｉｏｎ ｂｙ ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ ｐａｉｎ ｓｃｏｒｅ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｗａｓ ａｄｍｉｎｉｓ— ｔｅｒｅｄ ｔｏ ｓｕｒｖｅｙ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃ—ｆｏｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｉｎ ｎｅｆｏｐａｍ ｇｒｏｕｐ，ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｎｅｆｏｐａｍ ｐｌｕｓ ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｇｒｏｕｐ，ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ ｐａｉｎ ｓｃｏｒｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ １ ｈ ａｆｔｅｒ ｉｎｃｉｓｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅａｌ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ ｐａｉｎ ｓｃｏｒｅ ｉｎ ｎｅｆｏｐａｍ ｐｌｕｓ ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｇｒｏｕｐ ｌｅａｖｅ ｏｕｔ ｔｈｅ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｏｎ ｔｈｅ ｉｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ ａｎｄ ｔｈｅ ９５ ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅ ｉｎｔｅｒｖａｌ ｗａｓ ｎｏｔ ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｔ ｗｉｔｈ ｔｈｅｏｒｉａｌ ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ ｓｐｏｔ．Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｆｏｓ ｌｉｋｅ ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｓｈａｍ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ． Ｉｎ ｎｅｆｏｐａｍ ｇｒｏｕｐ，ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｎｅｆｏｐａｍ ｐｌｕｓ ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ＦＬＩ ｉｎ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ－ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｉｎ ｔｈｅ １／２ＥＤｓｏ ｂｏｔｈ ｎｅｆｏｐａｍ ａｎｄ ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ＥＤ５０ ｏｆ ｔｈｅｍ ａｌｏｎｅ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｎｃｉｓｉｏｎａｌ ｐａｉｎ，ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｆｏｐａｍ ａｎｄ ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｃｏｕｌｄ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃ－ｌｏｓ ｇｅｎｅ ｉｎ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ａｎｄ ｃｒｅａｔｅ ｄｏｓｅ－ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ．Ｔｈｅｉｒ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｄｕｃｅ ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］Ｎｅｆｏｐａｍ； Ｍｏｒｐｈｉｎｅ； Ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ； ｃ—ｆｏｓ ｇｅｎｅ； Ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ ｐａｉｎ ｓｃｏｒｅ 研究证实盐酸奈福泮与吗啡相比具有成瘾性 小，不良反应小，无麻醉性，无镇静作用、骨骼肌松弛 作用，对胃无刺激和不引起出血倾向，对呼吸、循环 达的影响。 １材料与方法 １．１ 药品、试剂和仪器：盐酸奈福泮注射液（湖北同济奔达 鄂北制药有限公司）、盐酸吗啡注射液（沈阳第一制药厂）、 异氟醚、ｃ－ｆｏｓ试剂盒、二氨基联苯胺（ＤＡＢ，北京中杉金桥 生物技术有限公司）、麻醉机（Ｄｒａｇｅｎ）。 系统抑制作用轻等优点＿１］。本实验通过切口疼痛模 型了解鞘内奈福泮和吗啡抗伤害效应的半效剂量 （Ｅ 。）及两者的相互作用，并且观察对脊髓ｃ＿ｌｏｓ表 山西医药杂志２０１０年１１月第３９卷第１１期上半月 Ｓｈａｎｘｉ Ｍｅｄ Ｊ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１０，Ｖｏ１．３９，Ｎｏ．１１ １ １ １ｌＩｒ １ １．２鞘内置管：选体质量２５０￣３００ ｇ的ＳＤ纯种雄性大鼠 于实验前放置在安静、温暖和避强光的饲养环境内２４ ｈ。 腹腔注射５ 水合氯醛６ ｍＩ ／ｋｇ，按杨建平等＿２］改良法制 备腰部蛛网膜下腔置管大鼠，导管插入２ ｃｍ，使开口的头 端适位于Ｌ ～ ，导管固定后，注入生理盐水０．１ ｍＬ冲洗导 管并观察插管处有无液体外溢。经皮下隧道将导管的另一 端引出于颈背部，外露１ ｃｍ固定，并用消毒的不锈钢针堵 塞导管外口，以防脑脊液外溢。术毕动物呼吸空气５～１０ ｍｉｎ后即完全清醒。取无运动障碍的动物于置管３ ｄ后蛛 网膜下腔注射２ 利多卡因２Ｏ Ｌ，如注药后３０ Ｓ未出现 双下肢麻痹，则舍去不用。动物均分笼单独饲养５ ｄ，即可 用于实验。 １．３切口痛模型建立：在吸入１．４ 异氟醚麻醉下，将大 鼠左后爪进行消毒准备后，按Ｂｒｅｎｎａｎ等 ］方法从足底近 端０．５ ｃｍ处向趾部作一长约１ ｃｍ的切口，切开皮肤后，用 眼科镊挑起足底肌肉并纵向切割，但保持肌肉的起止及附 着完整。按压止血后，用细线缝合皮肤共２针。整个手术 过程约为５ ｍｉｎ。手术切口以碘伏消毒并覆盖软膏，大鼠置 于安静、温暖、避强光的环境中喂养。 １．４动物分组及处理：为了研究证实奈福泮与吗啡之间的 相互作用是相加效应还是协同效应。本实验采用文献［４］ 提出的等效线法进行分析，即Ｉｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ简易作图的分 析方法：先分别求出奈福泮与吗啡单独使用时ＥＤ 。，再分 别将此两药ＥＤ 的Ｊ／２，１／４，１／８，１／１６合用，使可求出二 者合用时的各自的ＥＩ）５。，用两药合用时的ＥＤ 。与两药单独 使用时的ＥＤｓ。作Ｉｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ图，看奈福泮与吗啡之间的 相互作用。 选择鞘内置管后无运动障碍，且经利多卡因实验证实 导管确在鞘内的雄性ＳＤ大鼠８５只，分５组：①对照组５ 只：术前蛛网膜下腔注射０．９ 氯化钠２Ｏ Ｌ后３０ ｍｉｎ，吸 入１．４ 异氟醚５ ｍｉｎ后进行手术。②在切口疼痛模型中 以（实验组１ ｈ内累计疼痛评分值一对照组１ ｈ内累计疼痛 评分值）／对照组１ ｈ内累计疼痛评分值＞５０ 为镇痛有效 指标。根据预实验，术前鞘内注射奈福泮在切口疼痛模型 产生有效镇痛作用的ＥＤ 。值在５Ｏ～１５Ｏ ｇ。在此范围内， 采用等比系数（ｒ）为１．３１６，２０只健康大鼠设立５个剂量： ５Ｏ、６５．８、８６．６、ｌ１３．９、１５０ ｇ进行序贯试验。③吗啡（３～ １０ Ｆｇ）按镇痛有效指标，以等比系数１．７７８设立５个量：１、 １．７８、３．１６、５．６２、１０／ｚｇ。④分别求出奈福泮和吗啡的ＥＤ５。 后，将二药ＥＤｓｏ的］／ｚ，１／４，１／８，１／１６合用，由于两药达到 峰值效应的时间基本相同故此两药联合应用时应同时进行 鞘内注射，即可求出两药合用的ＥＤ 。。⑤二种药对ｃ—ｆｏｓ 表达的影响是否有协同作用，其分析方法采用Ｂｅｒｅｎｂａｕｍ 法。 本实验中先做奈福泮与吗啡的ＥＤ 。量对ｃ—ｌｏｓ表达的 影响，再做两药１／２ＥＤ 。的联合量对ｃ￣ｆｏｓ表达的影响，同 时作一生理盐水对照组，即可推断出二药对ｃ—ｆｏｓ表达是否 具有协同作用。分为５个组，每组５只，分别是：奈福泮的 ＥＤ 。组，吗啡的ＥＤ 。组，１／２（奈福泮＋吗啡）组，假手术组， 对照组。术后２ ｈ取出脊髓做免疫组织化学。所有大鼠均 按随机分配原则入组，给药时采用单盲法。所有治疗组在 用药后均以２Ｏ Ｌ生理盐水冲洗导管。所有动物均由山西 医科大学实验动物中心提供。 １．５行为学实验：参照Ｂｒｅｎｎａｎ等 ］方法，大鼠清醒后观 察后爪着地及负重情况，后爪被压迫发白表示负重。后爪 翘起不着地，计２分；后爪着地但不负重，计１分；后爪着地 并且负重，计０分。每５ ｍｉｎ观察１次，每次１ ｍｉｎ，以１ ｍｉｎ内最常采取的姿势为标准，共观察１ ｈ（０～２４分）。以 术侧足评分减去对侧足评分即为所得累积疼痛评分。 １．６免疫组织化学实验：术后２ ｈ腹腔注射５ 水合氯醛 ６ ｍＬ／ｋｇ麻醉，开胸显露心脏，经升主动脉插管，以２００ ｍＬ 生理盐水冲净血液，随即灌注含４％多聚甲醛的０．１ ｍｏｌ／Ｌ 磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）５００ ｍＬ（ｐＨ值为７．４）。取脊髓腰膨 大处，置于上述固定液中后固定约３ ｈ（４℃），再浸于２Ｏ 的蔗糖（４℃）中过夜至沉底。冠状冰冻连续切片，片厚２Ｏ ＭＬ，用二步法进行免疫组织化学反应。每只大鼠随机取５ 张切片，用Ｌｅｉｃａ显微镜下计数脊髓背角浅层（Ｉ～Ⅱ层）、 深层（Ⅲ～Ⅵ层）中ｌｏｓ样免疫活性（ＦＬＩ）神经元的数目。 以ＰＢＳ液代替一抗做阴性对照。用Ｂｅｒｅｎｂａｕｍ法分析奈 福泮与吗啡对ＦＮＩ神经元的抑制作用的相互作用，可将二 药在Ｉ～Ⅱ、Ｖ～Ⅵ层的抑制作用按下式换算成抑制率， 得出各组药的抑制率。 抑制率（ ）一（对照组的ＦＩ Ｉ—Ｎ一用药组的ＦＬＩ—Ｎ）／ 对照组的ＦＬＩ—Ｎ×１００ １．７统计学处理：所有数据均以ｊ－４－Ｓ表示，统计学处理采 用ＳＰＳＳ １３．０统计分析软件，组间比较应用方差分析。以 Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 ２ 结 果 ２．１预先鞘内注射奈福泮、吗啡以及联合用药对切口镇痛 作用ＥＤ 。值测定：对照组１ ｈ内累计疼痛评分值１７．０－４－ ２．０。根据计算公式得出预先鞘内注射奈福泮对切口镇痛 作用ＥＤ 。为８８．５ ｇ－ｇ，９５％ 为８０．４～９７．４ ｇ；预先鞘内 注射吗啡的Ｅ ０为５．３Ｏ ｇ，９５ 为３．８１～７．３７ Ｆｇ；联 合用药时对奈福泮合用时ＥＩ）ｓ。为１０ ｇ，９５％ａ为８．３ｌ～ １２．２ ｐｔｇ，吗啡合用时的ＥＤ 。为０．６０“ｇ，９５ Ｃ／为０．５Ｏ～ ０．７３ ｂｔｇ。 ２．２预先鞘内注射奈福泮、吗啡和二药联合用药时对切口 痛大鼠行为学的影响：鞘内注射奈福泮、吗啡和联合用药 可以产生剂量依赖性的镇痛作用。 ２．３等效线法（Ｉｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ）：用奈福泮与吗啡的镇痛效 应的ＥＤｓｏ和９５ 可信区间作Ｉｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ图，可见实测点 （１０，０．６）明显落在理论累加等效线的下方，且９５ 可信区 间不与理论累加点重合，由此可说明两药的相互作用是协 同的。见第１０２６页图１。 ２．４鞘内预注射奈福泮、吗啡和２种合用对脊髓灰质内 ｃ—ｆｏｓ阳性表达的影响：与假手术组比较，大鼠做切口痛２ ｈ ・１０２６・ 山西医药杂志２０１０年１１月第３９卷第１１期上半月 Ｓｈａｎｘｉ Ｍｅｄ Ｊ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１０，Ｖ０１．３９，Ｎｏ．１１ ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ 吗啡（‘Ｌｇ） 图１ Ｉｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ图 后生理盐水对照组可使同侧Ｌ ～ 脊髓灰质ｃ－ｆｏｓ蛋白表达 明显升高，ＦＬＩ阳性神经元在各层均有分布，但主要分布在 Ｉ～Ⅱ、Ｖ～Ⅵ层，以Ｉ～Ⅱ层分布最多。联合用药组脊髓 背角的ｅ－ｆｏｓ表达较两种药物单用组明显减少（Ｐ＜Ｏ．０５）。 见表１。 表ｌ 不同药物作用方法对ＦＬＩ神经元抑制作用（ ±ｓ） １）与奈福泮＋吗啡组比较Ｐ＜０．０５ 从表１中可以看出：１／２ＥＤ 。量的两药联合用药的抑制 百分比均比ＥＤ５。量的两药单用的抑制百分比大。根据 Ｂｅｒｅｎｂａｕｍ法，说明奈福泮与吗啡对ＦＬＩ－Ｎ表达的抑制作 用是协同效应。 ３讨 论 ｃ－ｆｏｓ原癌基因是刺激激活神经元的第二信使 与目的基因表达间的信息传递中介物，其蛋白表达 产物（表现为ＦＬＩ－Ｎ出现）在一定程度上与所受刺激 程度成正比。本实验所做的切口痛可能是由于兴奋 了脊髓背角伤害性感受神经元，从而诱发ｃ－ｆｏｓ表 达。原癌基因ｃ－ｌｏｓ的表达被视为特定刺激下神经 元功能活动的标志物，许多刺激，如伤害性刺激、电 针刺激均可诱发ｅ－ｌｏｓ的表达，但表达部位各有其特 点［５］。而本实验切口痛可诱发ｃ－ｆｏｓ的表达，诱发的 ＦＬＩ阳性神经元分布于脊髓背角各层，但主要集中 在大鼠手术侧背角的工～Ⅱ、Ｖ～Ⅵ层，说明这些神经 元参与了机械伤害信息的传导和。这一部位与 传递外周伤害性信息的初级传人纤维的终止区及背 角痛敏神经元的分布区一致，也与电生理记录的对 伤害性刺激反应的背角神经元的分布部位相重叠。 表明背角ＦＬＩ阳性神经元大都是感觉通路上的二级 神经元或中间神经元。术前鞘内注射奈福泮、吗啡 均可减少ＦＬＩ阳性神经元的数量，说明两药可能通 过抑制了与痛信号的传导和有关的脊髓背角 ＦＬＩ神经元的活性，阻止了痛信号在脊髓内的传导， 从而产生抗伤害作用。 据Ｇｉｒａｒｄ等Ｉ６］研究证实在注射角叉藻聚糖或 切开鼠后爪皮肤和肌肉所致的异常疼痛和痛觉过 敏模型中，同时注入奈福泮（１０ ｍｇ／ｋｇ）和阈下剂 量吗啡（０．３～１．０ ｍｇ／ｋｇ）降低或逆转异常性疼 痛，故奈福泮可以增强吗啡镇痛的效能。Ｔｉｒａｕｌｔ 等［７ 报道在腹部手术时若术中静脉注射２０ ｍｇ奈 福泮可减少术后吗啡用量，因此预用奈福泮可以有 效预防类罂粟碱诱发的疼痛敏感，减少吗啡的使 用量。但未见鞘内注射奈福泮与吗啡的相互作用 的报道，本实验中鞘内注射奈福泮与吗啡联合用药 的实际ＥＤ 。与理论ＥＤ 。值的差别和对ｅ－ｆｏｓ表达 的抑制作用都有统计学意义，同时在等效曲线也可 以说明两者有协同效应。考虑在本实验中奈福泮 和吗啡的协同效应可能是作用于一个外周刺激向 上传导的共同通路：外周脊髓高级中枢，即外周伤 害刺激一脊神经节外周突一伤害性传入神经纤 维一脊神经节的中枢突一脊髓背角一对侧脊髓丘 脑外侧束一背侧丘脑一经内囊后肢投射到后 回中上部和旁小叶后部。这是因为它们的关 键作用点不同：吗啡作用于脊神经节的中枢突 受 体，而奈福泮主要作用于脊神经节的中枢突的突触 前膜Ｎａ 通道，所以协同效应的产生得到了解释。 由于奈福泮的作用机制不清楚，两者合用是否还有 其他协同作用机制有待以后的进一步研究。 参考文献 １荆建敏，程桥．鞘内注射盐酸奈福泮对切口痛大鼠脊髓ｃ－ｌｏｓ表 达的影响．中国药物与临床，２００９，９（９）：８２４—８２６． ２杨建平，蒋豪，吴珏．大鼠蛛网膜下腔埋管并长期留置操作的改 进．中华麻醉学杂志，１９９３，１３（２）：１１０—１１２． ３ Ｂｒｅｎｎａｎ ３＂３，Ｖａｎｄｅｒｍｅｕｌｅｎ ＥＰ，Ｇｅｂｈａｒｔ ＧＦ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｎｃｉｓｉｏｎａｌ ｐａｉｎ．Ｐａｉｎ，１９９６，６４：４９３—５０１． ４ Ｔａｌｌａｒｉｄａ ＲＪ，Ｍｕｒｒａｙ ＲＢ．Ｍａｎｕａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｅ ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｃｏｍｐｔｅｒ ｐｒｏｇｒａｍ．２ｎｄ ｅｄ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｓｐｒｉｎｇ－Ｖｅｒｌａｇ，１９８７． ５ Ｂｕｌｌｉｔｌ Ｅ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃ－ｆｏｓ—ｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｎｅｕｒｏ— ｎａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｎｏｘｉｏｕｓ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ．Ｊ Ｃｏｍｐ Ｎｅｕｒｏｌ，１９９０，２９６：５１７－５３０． ６ Ｇｉｒａｒｄ Ｐ，Ｐａｎｓａｒｔ Ｙ，Ｇｉｌｌａｒｄｉｎ ＪＭ．Ｎｅｆｏｐａｍ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓ ｍｏｔ— ｐｈｉｎｅ ａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ ａｌｌｏｄｙｎｉａ ａｎｄ ｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｅｈａｖ。２００４，７７（４）：６９５－７０３ ７ Ｔｉｒａｕｌｔ Ｍ。Ｄｅｒｒｏｄｅ Ｎ，Ｃｌｅｖｅｎｏｔ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｎｅｆｏｐａｍ ｏｎ ｍｏｒｐｈｉｎｅ ｏｖｅｒｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｌａｒｇｅ－ｄｏｓｅ ｒｅｍｉｆｅｎ— ｔａｎｉｌ ｄｕｒｉｎｇ ｐｒｏｐｏｆｏｌ ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ ｆｏｒ ｍａｊｏｒ ａｂｄｏｍｉｎａｌ ｓｕｒｇｅｒｙ． Ａｎｅｓｔｈ Ａｎａｌｇ，２００６，１０２（１）：１１０—１１７． （收稿日期：２０１０—０７—１２） 作者简介：郑晓冬，男，１９６３年１２月生，主治医师，太原市 人民医院，０３０００１
