您好,欢迎来到小奈知识网。
搜索
您的当前位置:首页NaCl味觉刺激对钠缺乏大鼠臂旁核c-fos表达的影响

NaCl味觉刺激对钠缺乏大鼠臂旁核c-fos表达的影响

来源:小奈知识网
维普资讯 http://www.cqvip.com

CHINESE JOURNAL OF ANATOMY Vo1.30 N 6 2007 解剖学杂志2007年第3O卷第6期 NaCI味觉刺激对钠缺乏大鼠臂旁核c—fos表达的影响 耿丹丹 汪翠琴李坤武 白文忠△ 050016) (河北师范大学生命科学学院,石家庄摘要 目的:探讨臂旁核(PBN)在钠平衡行为调节中的作用。方法:成年雄性SD大鼠2O只,分为对照组、糖精溶液 口腔灌流组(Sac组)、NaCl溶液口腔灌流组(NaCl组)、注射furosemide后NaCl溶液口腔灌流组(Furo-NaC1组),观 察大鼠对味刺激的摄取反应和各组PBN各亚核内c—os表达水平差异。结果:d正常大鼠对糖精溶液显示嗜好性反 应,对NaCI溶液显示厌恶性反应,但钠缺乏大鼠对NaCI也表现出嗜好性摄取反应。Sac组PBN各亚核内f-los表达 水平均高于对照组;NaC1刺激增加内侧亚核(ms)内的f—os表达,d但减少外部外侧亚核(els)内的f—los表达;Furo- NaC1组e1s和外侧亚核(cls)内f-os表达显著高于其他3组,dms内的f—los表达低于NaC1组,但仍高于对照组 和Sac组。结论:els和c1s在钠平衡的味觉嗜好调节中发挥重要作用。 关键词臂旁核;钠缺乏;钠平衡; dos;大鼠 , , Effect of NaCl stimulIls on c-fos expression in parabrachial nucleus in sodillln deficient rat Geng Dandan,Wang Cuiqin,Li Kunwu,Bai Wenzhong ̄ (College of Life Science,Hebei Normal University,Shijiazhuang 050016,China) Abstract Objective:To investigate the role of parabrachial nucleus(PBN)on behavioral regulation of the sodium alh— anc Methods:Twenty adult male Sprague-Dawley rats were divided into four groups:control group,intraoral sac~ charin infusion group(Sac group),intraoral NaCl infusion group(NaCl group),and intraoral NaCl infusion after in— jection of furosemide group(Furo-NaCl group).The behavioral responses during received gustatory stimulus and c~ dos expression in PBN were observed.Results:Sodlum-replete rats exhibited ingestive behaviors for saccharin and aver— sive behaviors for NaCl,but sodium-deficient rats displayed ingestive behaviors for both saccharin and NaC1.In Sac group,the number of Fos-immunoreaetivity(F1)neurons in various subnueleus of PBN was greater than that the control group.C-fo ̄expression n imedial subnucleus(rns)was increased,but decreased by NaCl stimulus in external laterla subnu— cleus(elS).InFuro-NaC1group,thenumberofFIin els and centrallateral subnueleus(els)was significantlygreaterthanthat inthe otherthree groups Andinms,itwas smallerthanthatin NaClgroup,butgreaterthanthatin control andSacgroups. Cor ̄lm/on: dsand els ofparabrachil nuclaeusmayplay animportant rolein regulating sodiunlappetiteinmaintaining SO— . dium homeostasis. Key words parabrachial nucleus;sodium deficiency;sodium balance;C-fos;rat 钠是机体内重要常量元素之一。钠缺乏动物对 高浓度NaCI溶液表现出强烈的钠嗜好,这是机体恢 复钠平衡的必要调节过程。在啮齿类动物,臂旁核 (parabrachial nucleus,PBN)是味觉和一般内脏感 破坏PBN可削弱或阻断钠缺乏大鼠的钠嗜好[5]。但 钠缺乏大鼠的钠嗜好行为与PBN各亚核内 .厂0 表达 水平以及Fos-immunoreactivity(FI)神经元的分布是否 存在某种关系尚不清楚,本研究观察了NaCl味觉刺激 对PBN各亚核内c—fos表达的影响,旨在为钠平衡行 为调节机制的研究提供形态学依据。 1材料和方法 1.1动物处理及分组 觉信息上传到前脑的第二级换元站L1],在味觉和一般 内脏信息的传递、整合以及摄食行为的表达等方面发 挥着重要作用[2]。免疫组织化学研究表明,胃肠刺激 和味觉刺激可诱导 fos在PBN不同部位内表达L3_ 。 河北师范大学博士基金(L2001B03);河北师范大学青年科研基金 (L2003Ql1) 成年雄性SD大鼠20只,体质量230 ̄-.240 g,购 于河北省实验动物中心。购入后分笼饲养2 d,行口 △通讯作者,E-mail:baiwzh@163.coln 收稿日期:2006—12—04;修回日期:2007—05—08 腔插管手术:腹腔注射0.5 戊巴比妥钠(45 mg/kg) 763---—— 维普资讯 http://www.cqvip.com

麻醉,固定于脑立体定位仪上,手术暴露顶骨,将医 用聚乙烯管(内径0.86 mm,外径1.27 ram)的一端, 数PBN各亚核特定面积(ils、vls为441 1×441/,m, c1s、e1s为441/max641£ m,dis为441 F m×241/zm,Ills 由皮肤切口处经耳眼间皮下导鼠颊部并穿人口 腔,在口腔内加一垫圈固定,在顶骨上植人两螺丝 钉,将导管上部用牙托粉固定于螺丝钉上,以备将味 溶液经导管注人口腔。 手术恢复5 d后,将大鼠随机分为对照组、糖精组 (Sac组)、Naa组、速尿(furosemide)一Naa组(Furo-Naa 为441 1×1 481 m)内FI神经元。 所得数据用STAT6.0进行统计分析。各组 PBN不同亚核内的FI神经元数用 ±S表示,组间 差异采用单因素方差分析,差异显著者用Newman- Keuls检验进行样本均数间的多重比较。在差异显 著性检验之前,先进行正态性检验(叫检验)及方差 齐性检验(Bartlett法检验和Levene法检验)。 2结果 组),每组5只。对照组不给味刺激,ac组经口腔插管 S给以0.19/6糖精溶液5 ml(5 min内注完,下同),NaC1组 经口腔插管给以0.2 mol/L Naa溶液5 ml,Furo-Naa 组颈部皮下注射furosemide 2次(10 rag/次),间隔为 2 h,第2次注射后8 h,口腔内给以Naa溶液5 m1。在 2.1大鼠对味刺激的摄取反应 向大鼠口腔内灌注糖精溶液时,颊部快速运动, 在灌流完毕后舔舐嘴唇并试图舔食漏下的液滴;口 腔灌流NaC1溶液时,大鼠表现出摇头张口,前爪挠 嘴等厌恶性摄取反应;注射furosemide造成Na+缺 给以味刺激的同时,观察大鼠的行为变化。 给以味刺激后1.5~2 h,腹腔注射0.5%戊巴比 妥钠(80 mg/kg)将大鼠麻醉,开胸并做升主动脉插 管,用150 ml生理盐水灌流冲洗,再用500 ml含4 多聚甲醛的0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH 7.4)灌流固 乏的大鼠,给以NaC1溶液时则表现出与灌流糖精溶 液时相似的反应。 2.2 PBN各亚核内FI神经元的分布及其比较 不同处理组PBN各亚核内F1神经元数如表,阴 性对照组无FI免疫阳性神经元表达。正态性检验及 方差齐性检验表明资料满足正态性和方差齐性,单因 素方差分析表明,各亚核内FI神经元数不同处理组的 总体差异均显著(P<0.01)。均数间的多重比较 (Newman-Keuls检验)显示,i1s和dls内的FI神经元 数,在对照组、Naa组、Furo-NaC1组之间的差异无统 定。灌毕开颅取脑,放人相同固定液中后固定 3~4 h,置25 蔗糖溶液中至沉底。切取脑桥,做冰 冻冠状切片,片厚35 ttm。 1.2 Fos免疫组织化学反应 切片用兔抗Fos抗体(1:500,Santa Cruz)4℃ 孵育48 h,生物素化的羊抗兔IgG(1:200)4℃孵育 12 h,SP复合物(1:200)室温孵育4 h,DAB显色。 各步骤之间用PBS漂洗。切片按常规裱片、脱水、透 明、封片,光镜下观察。阴性对照用PBS代替兔抗 计学意义,但Sac组显著多于上述3组;cls和e1s内的 FI神经元数从多到少均依次为Furo-NaC1组、Sac组、 对照组、Naa组(附图),cls内FI神经元数,在对照组 Fos抗体,其余步骤相同。 1.3 Fos免疫反应神经元计数及数据处理 参照Paxions等的大鼠脑图谱和相关文献L6]将 PBN分为6个亚核,即:内侧外侧亚核(internal lat— eral subnucleus,ils),外侧亚核(central lateral subnucleus,cls),背侧外侧亚核(dorsal 1ateral sub- nucleus,dls),外部外侧亚核(external lateral subnu- cleus,els),腹侧外侧亚核(ventral lateral subnucleus, vls),内侧亚核(medial subnucleus,ms),每只大鼠在对 与NaC1组之间无显著差异,其他3组之间差异显著, e1s内的FI神经元在4组相互之间均有显著差异;ms 内的FI神经元数,在给以Naa时最多,注射furose— mide后再给以NaC1(Furo-NaC1组)则显著减少,但仍 多于对照组和Sac组;vls内的FI神经元数在Sac组与 NaC1组之间、NaC1组与Furo-NaC1组之间、Furo-NaC1 组与对照组之间的差异均无显著性,ac组显著多于 S对照组和FurO_NaC1组,Naa组显著多于对照组。 应断面上选取切片5张,用图像采集分析系统自动记 附表不同处理组PBN各亚核内兀神经元数比较(,l:5,x士s) Tab Number of Fos-immunoreactivity neurons in subnucleus of PBN following different treatments(,l 5, 士s) *P<iO.05 m control:AP%O.05 m sac;AP<IO.05 u Nacl 764---—— 维普资讯 http://www.cqvip.com

维普资讯 http://www.cqvip.com

间神经由腹直肌的外侧深面入肌,入肌点在中外1/3 交界处,所以在切取腹直肌肌皮瓣时宜从腹直肌的 内侧进入腹直肌深面,向外侧分离,以减少对肋间神 经的 从而最大限度地保留皮瓣的神经支配,保 证感觉功能的恢复。 以该两段肌腹能否作为的肌亚部还有待进一步 研究。腹直肌的神经支配为节段性,4个肌腹能够由 第8~10和第12肋间神经单独支配,由此可将腹直 肌分为4个神经肌亚部。综上所述,我们认为在利 用腹直肌进行亚部游离移植时,宜选择腹直肌的上 3.2 游离移植时选择合适的神经进行吻合 半部、下半部或者第2、3肌腹。 Isenberg等Do3在用TRAM皮瓣和DIEP皮瓣 参考文献 再造乳房时将第l1肋间神经与第4肋间神经进行吻 合,发现能较好地恢复再造乳房的感觉功能。在多 Robbins T.Rectus abdominis myocutaneous flap for breast 神经蒂腹直肌瓣移植修复晚期面瘫中将肋间神经与 [J].Reconstr Aust Nil Surg,1979,49:527. Yap L,Whiten S,Forster A,et a1.The anatomical and neu— 健侧面神经颧支、颊支吻合,游离腹直肌一腹膜瓣修复 rophysio1ogica1 basis of the sensate free TRAM and DIEP 舌缺损中将肋间神经与舌下神经降支吻合,术后能 flaps[J].Br J Plast Surg,2002,55:35—45. 较好地恢复面部表情肌及舌部的运动功能。由此可 邬江,徐达传,钟世镇.多神经蒂的腹直肌瓣移植修复晚期面瘫 见,选择1支或数支肋间神经与受区的神经进行吻 的应用解剖[J],中国临床解剖学杂志,1996,14(4):252—254. 合能较好地恢复受区的感觉及运动功能。在解剖过 廖贵清,苏宇雄,张金明,等.腹直肌一腹膜瓣修复舌缺损的临床 程中我们观察到下位肋间神经在腋中线附近发出外 研究[J].中华口腔医学杂志,2005,40(6):448 450, 侧皮支后,神经本干继续前行,直至进入腹直肌,为 高崇敬.用腹直肌肌皮瓣再造乳房的应用解剖学[J].临床锯剖 学杂志,1986,4(1):25. 腹直肌提供了较长的神经蒂。除腹直肌第1肌腹紧 刘立剐,Richard P R,94例腹直肌肌皮瓣肌皮动脉穿支的研 贴肋骨,使得胸8肋间神经的游离比较困难外,其余 究[J].中国修复重建外科杂志,2000,14(4):213—216. 的第9~12肋间神经都是理想的供肌神经蒂。 Liu J,Kumar V P,Shen Y,et a1.Modified Sihler’s technique 3.3腹直肌亚部化移植 for studying the distribution of intramuscular nerve branches 腹壁疝、腹壁膨出、腹壁薄弱等是腹直肌肌皮瓣 in mammalian skeletal muscle[J].Anat Rec,1997,247(1): 137—144. 切取后的一大缺点。切取部分腹直肌用于移植,尽 Slezak S,McGibbon B,Dellon A.The sensational transverse 可能保留供区功能是解决术后腹壁功能障碍的最好 rectus abdominis musculocutaneous(TRAM)flap:rectus of 办法,这就要求同时兼顾肌皮瓣及供区肌的血供及 sensibility after TRAM breast reconstruction[J].Ann Hast 神经支配。腹直肌由腹壁上、下动脉供血,入肌点分 Surg,1992,28:210—217. Blondeel P,Demuynck M,Mete D,et a1.Sensory nerve repair 别在第1、第3腱划水平,两动脉间有丰富的吻合。 in perforator flaps for autologous breast reconstruction:sen— 以腹壁上动脉或下动脉作为血管蒂,可以将肌肉分 sational or senseless?[J].Br J Hast Surg,1999,52:37—44. 为上、下2个大的肌亚部,也可以将第2、第3肌腹单 Isenberg J.Sense and sensibility:breast reconstruction with inner— 独作为2个小的肌亚部。但是由于第1和第4肌腹 vated TRAM flaps[J].Reconstr Microsurg,2002,18:23—28. 的血供只是来自腹壁上、下动脉的较细小的返支,所 (编辑:张志英) (上接765页) parabrachial nucld prevent conditioned taste aversions and sodiUlTl 参考文献 appetite in rats口].Behav Neurosci,1995,109(5):997—1008. [1]Bester H,Bourgeais L,Villanueva L,et a1.Differential pro— [6]Yamamoto T,Shimura T,Sakai N,et a1.Representation of jections to the intralaminar and gustatory thalamus from the hedonics and quality of taste stimuli in the parabrachial nucleus parabrachial area a PHA-L study in the rats[J].J Comp Neu— of the rat[J].Physiol Behav,1994,56(6):1197—1202. rol,1999,405(4):421—449. [7]Sewards T V.Dual separate pathways for sensory and hedonic [2]Steve R The parabrachial nucleus and conditioned taste aver— aspects of taste[J].Brain Res Bull,2004,62(4):271—283. sion[J].Brain Res Bull,1999,48(3):239—254. [8]Shimura T,Komori M,Yamamoto Acute sodium deficien— [3]Yamamoto T,Sawa K.Comparison of e-f0s-like immun0reae— cy reduces gustatory resp0nsiveness to NaG1 in the parabrachial tivity in the brainstem following intraoral and intragastric infu— nucleus of rats[J].Neurosci Lett,1997,236(1):33—36. sions of chemica1 solutions in rats[J].Brain Res,2000,866(1— [9]Radmila T,Steve R.Medial versus lateral parabrachial nucle— 2):144—151. us lesions in the rat:effects on mercaptoacetate-induced feed— [4]蒋恩社,闷剑群,宋新艾.味觉刺激和内脏刺激对大鼠臂旁核 ing and conditioned taste aversion[J].Brain Res Bull,2002, c—fos表达的影响[J].西安交通大学学报(医学版),2003,24 58(1):107—113. (1):20~23. (编辑:张志英) [5]Scalera G,Sp ̄tor A C,Norgren R Excitotoxic lesions of 一 

因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容

Copyright © 2019- huatuo3.com 版权所有 蜀ICP备2023022190号-1

违法及侵权请联系:TEL:199 1889 7713 E-MAIL:2724546146@qq.com

本站由北京市万商天勤律师事务所王兴未律师提供法律服务